基因轉殖鼠核心實驗室技術服務—基因改造小鼠的產製、淨化與保種

基因轉殖鼠核心實驗室提供高品質之基因改造小鼠相關技術服務,包括產製、淨化與保種,提高小鼠實驗的應用性,使研究人員更有效率地取得符合研究所需之基因改造小鼠,藉以創造優良的人類疾病動物模式,進一步為生物醫療相關實驗與新藥開發所用。

核心實驗室現行之技術服務項目包括:小鼠原核顯微注射、小鼠囊胚顯微注射、CRISPR/Cas(或TALEN)RNA顯微注射、小鼠淨化、小鼠胚胎保存、復育及相關諮詢等。自開放服務迄今,總計服務案件數共241件,包含小鼠原核顯微注射20件、CRISPR/Cas(或TALEN)RNA顯微注射1件、小鼠淨化62件、小鼠胚胎冷凍77件、小鼠胚胎保存61件與小鼠胚胎復育20件。簡述服務內容如下(亦可參考本核心實驗室網頁:http://tmc.nhri.org.tw/):

  • 小鼠原核顯微注射:利用顯微操作設備,將研究人員提供之轉殖基因DNA注射至小鼠受精卵之原核,再將其移置代理孕母鼠體內,經懷孕並產出攜帶轉殖基因之小鼠;
  • CRISPR/Cas(或TALEN)RNA顯微注射:應用此基因編輯技術產製基因剔除小鼠,僅須將TALEN或Cas9 mRNA(Cas9需搭配guide RNA)以顯微注射方式注入受精卵,再移至代理孕母鼠體內懷孕產出,仔鼠經定序篩選後即獲得基因剔除小鼠,大幅縮短傳統產製過程所需漫長之標的基因構築、胚幹細胞篩選與小鼠配種繁殖的時間。此技術平台已成功建立,可獲得基因剔除小鼠;相關服務流程及收費方式獲院方核可,已正式提供服務;
  • 小鼠囊胚顯微注射:近年來,國際小鼠表型分析聯盟(International Mouse Phenotyping Consortium, IMPC)整合數個基因改造小鼠機構,致力於建構約二萬個與人類基因同源之基因標的小鼠胚幹細胞,研究人員可直接向其購買研究所需之材料,節省基因構築及胚幹細胞篩選的冗長時間。藉由小鼠囊胚顯微注射技術,將基因標的小鼠胚幹細胞以顯微注射方式注入囊胚,將注射後囊胚移至代理孕母鼠體內,經懷孕後產下嵌合小鼠。該技術平台已建立完成,並可順利獲得具有生殖傳遞能力之嵌合小鼠,相關服務流程與收費方式亦已獲院方核可;
  • 小鼠淨化:攜帶特定病原之小鼠,經超數排卵與配種,取其二細胞期胚進行淨化,再移植至乾淨之代理孕母鼠體內懷孕並產出,通過本院實驗動物中心健康監測後,即完成淨化;
  • 小鼠胚胎冷凍:取小鼠八細胞期胚,以玻璃管法(vitrification)進行冷凍,保存於液態氮桶內,為研究人員節省小鼠飼養空間及費用,並保存珍貴之基因改造小鼠種原;
  • 小鼠胚胎復育:解凍研究人員提供的胚胎凍管,並將獲得之胚胎移置代理孕母鼠體內,使其懷孕並產出小鼠;
  • 服務相關諮詢:提供基因轉殖技術相關之服務諮詢。

文/圖:基因轉殖鼠核心實驗室

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