基因轉殖鼠核心實驗室—基因改造小鼠產製、淨化及保種之技術服務
Transgenic Mouse Core – Technical services for generation, rederivation, and preservation of genetically-modified mice


基因轉殖鼠核心實驗室的設立,旨在提供穩定且高品質之基因改造小鼠相關技術服務,使院內研究人員有效率地獲得符合其研究所需之基因改造小鼠,藉以創造優良的人類疾病動物模式,得以進一步應用於生物醫療相關實驗與新藥開發。

本核心實驗室提供及規劃之技術服務項目包括:小鼠原核顯微注射、小鼠囊胚顯微注射、CRISPR/Cas(或TALEN)RNA顯微注射、小鼠淨化、小鼠胚胎保存、復育及技術服務相關諮詢等。自開放服務迄今,累積服務案件量達214件,包括:小鼠原核顯微注射19件、小鼠淨化57件、小鼠胚胎冷凍71件、小鼠胚胎保存54件及小鼠胚胎復育13件。服務內容簡述如下(服務說明詳參本核心實驗室網頁:http://tmc.nhri.org.tw/

  • 小鼠原核顯微注射:利用顯微操作設備,將研究人員提供之轉殖基因DNA注射至小鼠受精卵之原核,再將其移置代理孕母鼠體內,使其懷孕並產出攜帶轉殖基因之小鼠。
  • 小鼠囊胚顯微注射:將業經基因標的之小鼠胚幹細胞注射入囊胚,再移置代理孕母鼠體內使其懷孕且產下嵌合小鼠;已完成技術平台建立,可成功地獲得具有生殖傳遞能力之嵌合小鼠。目前院方已核可相關服務流程及收費,惟為維持服務品質及避免細胞汙染,待院方完成規劃實驗室及專用細胞培養室空間,即可提供服務。
  • CRISPR/Cas(或TALEN)RNA顯微注射:在基因剔除小鼠產製過程中應用此基因編輯技術,僅須將TALEN或Cas9 mRNA(Cas9須搭配guide RNA)以顯微注射方式注入受精卵,再移至代理孕母鼠體內並懷孕產出,經定序篩選後即可獲得基因剔除小鼠,此舉大幅縮短傳統產製過程所需漫長之標的基因構築、胚幹細胞篩選及小鼠配種繁殖的時間。此技術平台已建立,可成功獲得基因剔除小鼠,服務流程及收費亦已經院方核可,待線上申請等網頁相關作業完成後,即提供院內研究人員使用。
  • 小鼠淨化:攜帶特定病原之小鼠,經超數排卵及配種,取其二細胞期胚進行淨化,再移植至乾淨之代理孕母鼠體內懷孕並產出,通過本院實驗動物中心健康監測後,即完成淨化。
  • 小鼠胚胎冷凍:取小鼠八細胞期胚,以玻璃管法(vitrification)進行冷凍,保存於液態氮桶,為研究人員節省小鼠飼養空間及費用,並保存珍貴之基因改造小鼠種原。
  • 小鼠胚胎復育:將研究人員提供的胚胎凍管解凍後,移置解凍胚胎於代理孕母鼠體內,使其懷孕並產出小鼠。
  • 技術服務相關諮詢:除服務內容說明之外,亦提供基因改造小鼠相關之技術服務諮詢,包括載體設計、小鼠配種及基因型分析等。

文/圖:基因轉殖鼠核心實驗室

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