本院「臺灣斑馬魚核心設施實驗室」之斑馬魚胚胎水質毒性測試,通過財團法人全國認證基金會(Taiwan Accreditation Foundation, TAF)認證

美國國家衛生研究院(National Institute of Health, NIH)於2009年公布,斑馬魚是僅次於大、小鼠為第三種最常使用的實驗動物模式,主要因為斑馬魚具有許多獨特的優點如:胚胎透明容易觀察,發育快,三個月後即達性成熟,子代數量多且維護成本相對低廉,最重要的是與人類基因有70%的相似性,所以廣泛地應用在發育生物學、分子生物與基因遺傳學與人類疾病的研究上。又由於國際間日趨重視實驗動物3R的使用準則,使斑馬魚胚胎的應用更加廣泛,尤其在毒性測試的領域中,幾乎可以完全使用斑馬魚胚胎取代魚隻,以大量減少動物的使用量。

本院「臺灣斑馬魚核心設施實驗室」於2009年設立,並從2010年起獲國科會的經費支持,成為「臺灣斑馬魚核心設施―國衛院分部」(以下簡稱本中心),長期提供研究者高品質種魚、技術諮詢與技術服務,亦積極參與不同年齡層學生的科普活動,推廣科學知識。在國科會與本院的經費支持下,自2010年至今,不但成為斑馬魚國際資源中心(Zebrafish International Resource Center, ZIRC)的第一個區域性中心(Regional Center),並於2015年3月獲得國際實驗動物管理評鑑及認證協會(AAALAC International)的認證,更在2018及2022 二度獲得持續認證。這些年所收集以及維護的斑馬魚品系和研究相關材料已成為斑馬魚研究社群的重要資源,且每年所舉辦的斑馬魚研習課程至目前為止更已培育了417位種子學員,定期及不定期舉行之斑馬魚研討會均嘉惠了許多實驗室。另外,本中心對於新技術之研發及推廣也不遺餘力,近年來對推廣Tol2-介導的斑馬魚基因轉殖技術及利用TALEN、Cas9-CRISPR介導的基因編輯之應用等更是有卓著的進展。

斑馬魚是經濟合作發展組織(Organization of Economic Cooperation and Development, OECD)所推薦使用於水生生物急毒性試驗的魚種之一(如公告方法TG-236(生物急毒性試驗)、TG-250(內分泌干擾化學物試驗)),國際標準化組織(International Organization for Standardization, ISO)也建立了以斑馬魚胚胎為主的廢水排放標準之測試方法,藉以評估水中所含物質對淡水生脊椎動物之影響。本中心在二年前開始建立水質毒性測試技術,經實驗室團隊之努力,於2022年10月19日通過TAF認證成為ISO-17025測試與校正實驗室,認證方法為ISO-15088「斑馬魚胚胎廢水急毒性測試」。這是利用健康的野生型(AB)斑馬魚胚胎進行排放廢水的水質檢測,整個實驗流程須符合所有的控制條件及完全的標準化,概略步驟為:將健康的斑馬魚胚胎浸泡於不同稀釋倍數之待測廢水,在26 °C ± 1 °C的培養箱中經過48小時的培養後,觀察並計算胚胎的存活率。最終的報告以LIDegg (lowest ineffective dilution​) 數值呈現(流程如下圖)。

斑馬魚胚胎急毒性檢測為國際推薦之有效的生物毒性偵測方法,其應用範圍廣泛(如環境、農產品、廢水等),除了可以評估對附近水域生態造成之影響外、更是國內紡織、染料等產品外銷至歐盟規範bluesign®標章中必須具備的水質檢測標準。

獲得TAF ISO17025的認證後,本中心將更有信心提供學研業界高品質之測試服務,如有相關毒性測試之檢測需求,歡迎與本中心經理劉大瑋聯絡(email:DWL@nhri.edu.tw,電話:037-206166分機35325)

 

文/圖:分子與基因醫學研究所游美淑高級技術師、江運金副研究員

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